上海大学成为全市第一个建立中共支部的学校。上海大学是“五卅运动”策源地，5月30日，上大师生积极参与社会演讲和示威游行，遭到租界巡捕开枪镇压，上大学生何秉彝遭枪击受重伤，次日因抢救无效牺牲。6月4日，学校被万国商团及英、美海军陆战队巡捕武装占领、封闭。7月，学校迁到闸北中兴路，设临时办事处继续招生，后租闸北青云路师寿坊（今青云路167弄）多幢民房为校舍。9月10日，开学上课，在青云路弄堂口挂于右任所书“上海大学临时校舍”的牌子。当时学生已增加到800人。还附设有平民学校和青云学校，由上大师生义务任教，在群众中普及文化知识。五卅运动前后，上海大学师生积极参加上海三次工人武装起义。